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                EN

                解析糖♂基化修飾及位點分析

                經常墨姑娘聽到糖基化修飾,今天→帶大家一探究竟。什麽是糖基化修飾呢?糖基化是在糖基轉移酶的】控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程,發生於內質網和高々爾基體。糖基化修飾是一類金光轟然炸開非常重要的翻譯後修飾,大部分膜蛋白和♀分泌蛋白均為糖蛋白,糖基化大事不好修飾不僅影響蛋白質的空間構象、活性、運□輸和定位,同時在信號轉導、分子識別,免疫等過程中發揮重要作用。

                通∮常將糖基化分為兩類:N連接的身上糖基化 (糖通過一個N原子』連接在Asn)和O連接的糖基化 (糖通過O原子連接在Ser/Thr)。先看N-糖的生物合成,在糖苷酶的作用下,N-乙酰▓葡糖胺(GlcNAc)和甘露糖(Mannose)分子被連接▽在Asn殘基上,形成N-糖的基本架構。半乳糖(Gal)、N-乙酰神經氨酸他竟然會在劍皇星(Neu5AC)、N-乙酰半乳糖㊣胺(GalNAc) 等分子會參與糖鏈形成一個全盛的完整過程。

                再來看◥一下O連接的糖基化,O-糖在↑個體發育、腫瘤發生、細胞粘附等諸多生命活動中均發揮重要作用,但是由於缺乏共有修飾序列信息和有效的分析手◥段,因此對O連接的糖基化修飾知之甚少。O連接的糖基化是由不同的糖基轉移酶催化的, 每次加上一個◆單糖,最後在糖鏈末端加上唾液酸殘基(圖中紫︻色方塊)。

                如何得知到底哪個位點發生了O-連接√的糖基化呢?是否有一種酶能夠切割糖基化位點所●在的氨基酸,使得★蛋白會被切成幾段,這樣以來通過質譜分析或ξ者其他方法就能分析出糖基化發生火鏡冷然笑道的位點呢?答案Yes. 這款酶就是瑞典Genovis公司的OpeRATOR,該酶在唾液酸去除酶SialEXO的幫助下,可以切割O-糖基化位Ψ點所在氨基酸的N端,真正做到了哪裏有糖切哪裏!酶切示意圖如下↘:

                兩種酶的▓特征如下圖所示:

                這樣的O-糖位點切割酶是否對您的實驗有幫助呢?我們還提供配套的試劑盒,試劑盒中◣提供O-糖蛋白親和柱,OpeRATOR和SialEXO,可柱上酶切並特異性回收O-糖肽段。

                註:圖片等部分信息來源網絡

                中源生物是Genovis授權的中國區代理

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