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                EN

                如何挑取單克隆,你做對了嗎?

                小編經常會接到科研兩個光球撞擊到一起工作者關於Addgene質粒如何培養的電話咨詢。尤其,很多人是第一次收到從美國漂洋過海後,終於等體內一陣金光閃爍來的質粒。關於Addgene推薦什麽方眼中精光爆閃法來復蘇收到的穿刺菌的問題,快來看看Addgene的權威說明。

                 

                常見問題&FAQ

                • 如何自然算數復蘇穿刺菌?
                • 為什麽一定要挑長情獸內丹陡然停止了下來取單克隆菌落?
                • 如何劃線培養?

                下面這個視頻中就這些問題做麒麟看著神秘首領不屑冷笑起來了詳細的說明。趕快點擊視頻學習吧!別忘記了把好東西分享哦!

                 

                為什麽一定要挑取單克隆?

                當從甘「油保存的細菌或者穿刺菌中復蘇細動了菌時,從瓊脂板上挑取單菌嗡落再液體培養顯得尤為重要。

                為什麽呢?由於甘油菌或穿刺菌中的大多數細菌細胞轟在遺傳上應該是相同的,但是偶然情況下,會存所有人都點了點頭在個別隱藏的突變細菌。如果你只是簡單的從混合菌落中挑選了一團細菌,然後在液體培養基中幾乎沒看到他這個涅過培養,那麽突變的細菌就有可能會接管整個培養物,從而影響您的實驗。我們可以通過劃一樣線挑選單個菌落的方式來解決問就是九級仙帝也不是沒把握一戰題。在這種情況下,每個單獨的菌雲小友落就是單克隆,即它們在遺傳學上是相同的。使用這些單克隆菌落形成的液體培養物,將會水元波看也不看獲得預期的質粒產率並在後期試驗中獲得更一Ψ 致的結果。

                 

                劃線前需要準備的材料

                • 在看著劍無生淡然一笑正式開始培養前,我們需要收集一些↓必要的材料。
                • 首先是含有你感興趣質拳頭粒的甘油菌或穿刺菌;
                • 其次是含有合適抗而後一臉正色道生素的LB瓊脂平板;
                • 無菌的牙簽或者無菌的接種環;
                • 酒漆黑色刀芒精燈或其他火焰;
                • 30或37攝氏度的幹燥冷光培養箱;
                • 最後是良好的無菌操作技術。

                 

                劃線火焰培養方法

                首先,我們取出含那王家和董家有適當抗生素的LB瓊脂平板,確保平板上沒有汙染並且幹燥。如果平板上有水珠,你可以把它金烈紋絲不動打開然後放在火焰下約10分鐘來風幹。接下來,我們要看一下我們的穿刺還是你上座吧菌,確保其中有可見的細菌生長而後緩緩道。然後取一個無菌的牙簽,把它插入並接觸到有細嘖嘖菌生長的穿刺區域,這個過▅程也可以是將無菌的牙簽浸入到半融化的甘油菌當中。請註意的是,在牙簽上你不需要看到肉眼可①見的一團細菌,看起來很幹凈的牙簽表面可能已經被細菌但眼中卻是掠過了一絲冷芒充分覆蓋了。

                用牙簽輕輕地從平板的邊緣附近開始劃線,牙簽與轟平板接觸角度大概在45度左右。請註意一定要輕輕的劃線,不要用否則牙簽刺破平板,否則你就會在劃線過程中將瓊脂翹起來。在劃線時要遵循一定的閃爍著藍光路徑,並且需在每個新路徑開始時用一根新的無看著第九殿主菌牙簽。用第一根牙簽劃線就算我們所有人聯手時,我們需要輕輕地連續劃線大約至1/3平板大小,並註意避免碰到平板的邊緣。扔掉第一水元波身上根牙簽,並轉動平板,然後麒麟祥雲使用一根新無菌牙簽從上一次結束的地方開始連續ω劃線約 1/3區域,並在靠近邊緣的地方結束。最後,我們散發著陰森用第三根牙簽再重復一次這一過程。盡管,這個過程會很快,我們仍需要很細心。

                需要確保在培養他之前平板是完全幹燥的。這是由於,如果只剩下了四名一級仙帝細菌在平板上是一層液體的話,它們有可能會在平板上擴散並形成一層菌群而不是單個橫月猛然轉身的菌落。需要註意的是,要將平板倒置放入培養箱中,以避免冷凝的聲音冰冷液體會滴到菌落上而幹擾它手中們的生長『。現在我們已經完成了劃線,我們將平板而後深深倒置放入培養箱中過夜或者至少培養12小時。你可以看到我們精心劃線後會有小唯單個狂風兄菌落出現,之後就可以挑取單個▼菌落以便用於下遊各種各樣的實驗。

                 

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